1.準備好所有試驗額定所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等;
2. 依據檢測標本數量確認所需試劑的量;
3. 按闡明書(shū)將所用試劑平衡至室溫,制造所需試劑;
4. 標本制備要規范,每份標本體積要按2-3個(gè)復孔以上的量制備,盡量分裝做備份。短期內無(wú)法試驗者,留意低溫保存。
試驗中為了確認信號和背景應將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預試驗中進(jìn)行彼此相抗的滴 定。同時(shí),應包括在適當范圍內的規范品的系列稀釋。按試劑闡明書(shū)慣例供給的范圍進(jìn)行操作。
規范品的制造:對于每種細胞因子應仔細閱讀闡明書(shū),留意每批的細節。在運用細胞因子前,瞬時(shí)離心試劑瓶,盡可 能多地回收其間的細胞因子。依據每批闡明書(shū)中的細節,將凍干的細胞因子復溶。
為了優(yōu)化靈敏度,主張過(guò)夜孵育規范品和標本。若運用過(guò)氧化物酶作為顯色體系,應禁止在洗液和稀釋液中加疊氮 鈉,疊氮鈉可抑制過(guò)氧化物酶的活性。當測定混合液體中的抗原時(shí),如血清,主張在標本稀釋液中加不相干的Ig。
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